革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創立。未經染色之細菌，由于其與周圍環境折光率差別甚小，故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環境形成鮮明對比，可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征，而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復染法。

革蘭氏染色液原理：

通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙，因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。染色的差異主要是由于陰性與陽性細菌細胞壁的差異所引起的。

革蘭氏染色液材料：

1.葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。

2.結晶紫染色液

3.革蘭氏碘液

4.95%酒精。

5.番紅染液

6.載玻片方法、涂片標本的制備（見實驗一）

革蘭氏染色法1.初染：在上述已固定的涂片上，滴加結晶紫染液，染色1分鐘，水洗。

2.媒染：滴加革蘭氏碘液，作用1-3分鐘，水洗3.脫色：滴加95%酒精，并頻頻搖動玻片，至無紫色脫出為止（約20秒），水洗復染：加番紅染液，復染半分鐘，水洗，用吸水紙印干后，油鏡檢查結果：視野中可以察見兩種細菌葡萄球菌：紫色、球形、葡萄狀排列。

大腸桿菌：紅色、桿狀、散在排列。

毓秀生物科技（上海）有限公司是一家專注于生物科技前沿技術研發和科研技術服務的公司，公司建有專業的分子生物學、細胞生物學、組織病理學實驗室，為眾多生物醫藥企業、科研機構、醫院及高校提供分子生物學、細胞生物學、病理形態學等方面科研服務。公司核心團隊曾在國內外許多優秀學府從事過多年研發工作，秉承“為客戶創造價值，為員工實現夢想，為社會創造財富"的經營理念，堅持以技術創新為先導，以服務質量為根本，為中國生物醫藥和科學研究提供優質的產品和技術服務。